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行业标准

微生物肥料行业标准(二)

 42成品无害化指标表2成品无害化指标编号参数单位标准限值1.蛔虫卵死亡率%95!1002大肠杆菌值1013汞及化合物(以Hg计)mg/kg$54镉及化合物(以Cd计)mg/kg$35铬及化合物(以Cr计)mg/kg$706砷及化合物(以As计)mg/kg$307铅及化合物(以Pb计)mg/kg$605检测方法51外观感观检验符合41成品技术指标。

52有效活菌数和杂菌含量测定521试剂和溶液a.无菌水、蒸馏水;b.选择培养基(附录A);c.刚果红染液(0.5%)。

522仪器a.显微镜1000;b.摇床旋转式200r/min;c.恒温培养箱;d.恒温烘干箱;e.灭菌锅;f.扭力天平(分度值0.01g);g.玻璃仪器(灭菌的9cm平皿、10mL、5mL、1mL吸管、三角瓶、玻璃刮刀)。

523测定步骤5231采样应不少于500g,从中称取10!20g(精确0.01g),加入带玻璃珠的100!200mL的无菌水中(液体菌剂取10!20mL,加入90!180mL的无菌水中),静置20min后在旋转式摇床上200r/min充分振荡30min,即成母液的菌悬液。

5232用无菌吸管吸取5mL上述母液的菌悬液加入45mL无菌水中,混匀成110稀释的菌悬液,这样依次稀释,分别得到11l02,11103和11104,11105等浓度(每个稀释度必须更换无菌吸管)。

5233用1mL无菌吸管分别吸取不同稀释度菌悬液0.1mL,加至直径为9cm平皿的琼脂培养基表面,用无菌玻璃刮刀将菌悬液均匀地涂于琼脂表面。或取1mL不同稀释度菌悬液加入培养皿内,与琼脂培养基混匀。每个样品取3个连续适宜稀释度,每一稀释度重复3次,同时加无菌水的空白对照,培养2! 5d,每个稀释度取5!10个菌落的菌体,涂片染色,显微镜观察识别后计数菌落。

524计算公式:统计算出同一稀释度三个平皿上菌落平均数。

根据式(1)和式(2)计算:菌剂含菌数=菌落平均数稀释倍数母液菌悬液的体积菌剂数…………(1)杂菌率(%)=杂菌数有效菌数+杂菌数100……………………(2)根据菌落特征判定,分别计算出制品中的特定微生物及杂菌数率。固体(包括颗粒)菌剂含菌数以亿/g表示,液体菌剂含菌数以亿/mL表示。

525菌落计数5251以平板上出现30!300个菌落数的稀释度平板为计数标准。

5252当只有一个稀释度,其平均菌落数在30!300之间时,则以该平均菌落数乘以其稀释倍数(见表3例1)。

5253若有两个稀释度,其平均菌落数均在30!300之间,应按两者菌落总数之比值来决定。若其比例小于2应计数两者的平均数,若大于2则计数其中稀释较小的菌落总数(见表3例2及例3)。

5254若三个稀释度的平均菌落数均大于300,则应按稀释度最高的平均菌落数乘以稀释倍数(见表3例4)。

5255若三个稀释度的平均菌落数均小于30,则应按稀释度最低的平均菌落数乘以稀释倍数(见表3例5)。

5256若三个稀释度的平均菌落数均不在30!300之间,则以最接近300或30的平均菌落数乘以稀释倍数(见表3例6)。

表3计算菌落总数方法的示例不同稀释度的平均菌落数两个稀释度菌落总数例次10-510-610-7菌落数之比个/mL或个/g1143115922-1.610822760235311.32.710832676136342.51.41084无法计数1142312-3.1109528125-2.81066无法计数30318-3.010853含水量测定531仪器a.土壤铝盒;b.扭力天平(分度值0.01g);c.恒温烘干箱;d.干燥器。

532测定步骤称取样品30!40g(精确到0.01g)二份放入铝盒中,于105条件下烘烤4h直至恒重,取出后放入干燥器内冷却,一般冷却20min,再称其残重和铝盒重,损失量即为水分含量。

533计算公式:mH0-m12O%=m100……………………………………………………………(3)0式中:m0———表示烘干前样品重,g;m1———表示烘干后样品重,g。

54pH值测定541试剂和溶液无离子水。

542仪器a.烧杯;b.酸度计;c.扭力天平(分度值0.01g)。